【摘要】 【目的】觀察安宮牛黃丸對盲腸結扎穿孔術致膿毒癥模型大鼠肺組織高遷移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表達及髓過氧化物酶(MPO)活性的影響.【方法】75只雄性SD大鼠隨機分為正常對照組,膿毒癥模型組(CLP組),1a 氰基 (3,4 羥基)N 芐苯乙烯胺組[AG490組,術前0 5 h皮下注射8 mg/kg的Janusk激酶2(JAK2)抑制劑AG490],雷帕霉素(RPM)組[RPM組,術前0 5 h皮下注射0 4 mg/kg的信號轉導和轉錄激活子(STAT)抑制劑RPM],安宮牛黃丸低、中、高劑量組(術前0 5 h和術后6 h按1 0、2 0、3 0 g/kg劑量灌胃).于造模后24 h活殺動物,留取肺組織,采用逆轉錄m聚合酶鏈反應(RT PCR)法檢測肺組織HMGB1 mRNA表達水平,同時測定MPO活性.【結果】與正常對照組比較,CLP組肺組織HMGB1 mRNA表達顯著增強(P<0 01),MPO活性顯著增高(P<0 05).與CLP組比較,AG490組、RPM組以及安宮牛黃丸低、中、高劑量組HMGB1 mRNA表達顯著下調(P<0 01),AG490組、RPM組以及安宮牛黃丸低、中劑量組MPO活性顯著降低(P<0 05或P<0 01).【結論】安宮牛黃丸治療膿毒癥的作用與AG490、RPM等JAK/STAT信號通路抑制劑相似,可下調肺組織HMGB1基因表達,降低肺組織MPO活性,減輕腹腔感染所致的急性肺損傷.
【關鍵詞】 安宮牛黃丸/藥理學;膿毒癥/中藥療法;基因表達調控;疾病模型,動物;大鼠
高遷移率族蛋白B1(HMGB1)是嚴重感染所致膿毒癥的重要晚期介質,參與了包括肺臟、肝臟、腸道在內的多器官損害過程[1-2].肺組織髓過氧化物酶(MPO)活性可定量反映肺組織中性粒細胞(PMN)扣押與聚集的數目,在一定程度上反映肺組織的炎癥損傷程度[3-4].本研究旨在觀察盲腸結扎穿孔致膿毒癥大鼠肺組織HMGB1 mRNA表達的變化規律,及安宮牛黃丸對肺組織HMGB1 mRNA表達和炎癥損傷指標MPO活性的干預作用并探討其可能作用機理,為尋找中醫藥干預膿毒癥的有效途徑提供依據.現報道如下.
1材料與方法
1 1主要藥物、試劑與儀器安宮牛黃丸由北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠生產(批號:5010279),水合氯醛由國藥集團化學試劑有限公司生產(批號:20071210),MPO活性檢測試劑盒由南京建成科技有限公司提供(批號:071103),1a 氰基 (3,4 羥基)N 芐苯乙烯胺(AG490)為美國Alexis Biochemicals產品,雷帕霉素(RPM)為美國Alexis Biochemicals產品,總RNA提取試劑盒為日本TaKaRa公司產品,逆轉錄m聚合酶鏈反應(RT PCR)試劑盒為立陶宛Fermentas (MBI)公司產品,WFJ 7200型可見光分光光度計為尤尼柯(上海)儀器有限公司產品.
1 2動物模型制備健康雄性SD大鼠75只,體質量